纳氏比色法和蒸馏—酸滴定法测定氨氮具体步骤

氨氮以游离氨(NH3)或铵盐(NH4+)的形式存在于水中，两者的组成比取决于水的pH值。pH值偏高时，游离氨比例较高，反之，铵盐比例较高。
   在无氧条件下，亚硝酸盐受微生物作用还原为氨；在有氧条件下水中的氨亦可转变为亚硝酸盐，继续转变为硝酸盐.
测定氨氮的方法主要为纳氏比色法和蒸馏—酸滴定法。测定仪器有COD氨氮总磷总氮快速测定仪​。
水样应保存在聚乙烯瓶或玻璃瓶中，尽快分析。水样带色或浑浊时要进行水样的预处理，对污染严重的要进行蒸馏。

一、预处理
1、絮凝沉淀法
加适量硫酸锌于水样中，并加氢氧化钠使成碱性，生成氢氧化锌沉淀，经过滤除去颜色和浑浊。
仪器：100ml容量瓶
试剂:
(1)10%(m/v)硫酸锌溶液:称取10g硫酸锌溶于水，稀至100ml。
(2)25%氢氧化钠溶液：25g氢氧化钠溶于水，稀至100ml,贮于聚乙烯瓶中。
(3)浓硫酸
步骤:
取100ml水样于容量瓶中，加入1ml10%硫酸锌和0.1-0.2 ml25%氢氧化钠，混匀，放置使沉淀，用中速滤纸过滤，弃去20ml初滤液。
2、蒸馏预处理
调节水样pH在6.0-7.4的范围，加入适量氧化镁使呈微碱性，蒸馏释出氨，吸收于硼酸溶液，采用纳氏试剂或酸滴定法测定。
仪器：
带氮球的定氮蒸馏装置：500ml烧瓶、氮球、直形冷凝管、橡胶导管（6*9）、锥形瓶、电炉
试剂：
(1)1mol/L盐酸溶液：吸取83ml浓盐酸加入200ml水中，稀至1000ml。
(2)1mol/L氢氧化钠：称取40g氢氧化钠溶于水，稀至1000ml
(3)轻质氧化镁(MgO)：氧化镁于500℃在马弗炉中加热0.5h。
(4)0.05%溴百里酚蓝指示液(PH6.0-7.6)：将0.05g溴百里酚蓝溶于100ml水中。
(5)硼酸吸收液:称取20g硼酸溶于水，稀至1L。
步骤：
(1)装置预处理：加入250ml水于凯氏烧瓶中，加约0.25g氧化镁和数粒玻璃珠，加热蒸馏出约200ml，弃去瓶内残液。
(2)水样的蒸馏：
①取250ml水样移入凯氏烧瓶中，加数滴溴百里酚蓝；
②用氢氧化钠或盐酸调节至pH在7左右；
③加入0.25g氧化镁和3～5粒玻璃珠；
④立即连接氮球和冷凝管，导管下端插入50ml硼酸吸收液面下；
⑤加热蒸馏，至馏出液达200ml时，停止蒸馏，定容至250ml。
⑥采用纳氏试剂或酸滴定法测定。
注意事项：
(1)蒸馏时不要发生暴沸和产生泡沫，造成氨吸收不完全。
(2)蒸馏前一定要先打开冷凝水；蒸馏完毕后，先移走吸收液再关闭电炉，以防发生倒吸。

二、纳氏试剂比色法
  1、原理：碘化汞和碘化钾的碱性溶液与氨反应生成黄色胶态化合物，此颜色在较宽波长范围内具强烈吸收，通常在410-425nm范围内。
  2、干扰：水中的颜色和浑浊影响比色，用预处理去除。
  3、适用范围：本方法*低检出浓度为0.025mg/L，测定上限为2mg/L，水样预处理后，可适用于工业废水和生活污水。
  4、仪器：722分光光度计   50ml比色管
试剂：
(1)纳氏试剂：
称取16g氢氧化钠溶于50ml水中，充分冷却至室温;
另称取7g碘化钾和10g碘化汞溶于水，然后将此溶液在搅拌下徐徐注入氢氧化钠溶液中，用水稀至100ml，贮于聚乙烯瓶中，避光保存。
(2)酒石酸钾钠
   称取50g酒石酸钾钠溶于100ml水中，加热煮沸以除去氨,放冷，定容至100ml。
(3)氨标准贮备液
   称取3.819g经100℃干燥过的氯化铵溶于水中，移入1000ml容量瓶中，稀释至标线此溶液每毫升含1.00mg氨氮。
(4)氨标准使用液
移取5.00ml氨标准贮备液于500ml容量瓶中，用水稀至标线。此溶液每毫升含0.010mg氨氮。
5、实验步骤：
(1)校准曲线的绘制
①吸取0、0.50、1.00、3.00、5.00、7.00、和10.0ml氨标准使用液于50ml比色管中，加水至标线；
②向比色管加入1.0ml酒石酸钾钠溶液，再加入1.5ml纳氏试剂，混匀，放置10分钟。
③在波长420nm处，用光程20mm比色皿，以水为参比，测量吸光度。利用回归方程（y=bx+a）计算。
(2)水样的测定
取适量(预处理后)水样，加入50ml比色管中，用蒸馏水稀释至标线，加入1.0ml酒石酸钾钠溶液，再加入1.5ml纳氏试剂，混匀，放置10分钟。同校准曲线步骤测量吸光度。

注意事项：
(1)蒸馏预处理后水样，要加入一定量1mol/L的氢氧化钠中和硼酸。
(2)纳氏试剂中碘化汞和碘化钾的比例对显色影响很大，静置后生成的沉淀应出去。
(3)纳氏试剂有毒性，应尽量避免接触皮肤。