求教关于离子交换色谱法中柱色谱法的具体操作流程

如题，想了解关于柱色谱法的操作流程，如果有相关书籍是最好的。包括预处理，装柱，离子交换，洗脱，收集分析等。
具体问题：
1、湿法装柱的具体操作过程？
2、离子交换过程所用溶液加入后，液面是否需要高于固定相最上层？交换溶液应该在柱内停留一段时间在从下部排出液体还是下部始终保持一定的开度，让交换溶液以一定的速率向下流动？
3、洗脱过程中一定体积的洗脱液是一次性加入到柱内，还是分次加入？洗脱液需要高于固定相最上层？
4、如果想按一定体积连续收集洗脱液，应该如何操作？

1.湿法装柱要求不能让树脂柱产生气泡，要求装置时出水口流速要慢与进水口，水要保证1ml液位2.对于树脂使用流速一般是树脂体积的一倍，物料或者水要持续保证在树脂液位2ml以上，最好采用虹吸3.洗脱液是树脂体积的三倍用量最佳，流速同样是树脂体积1BV4.采用虹吸，给层析住上头用橡胶塞堵住用玻璃导管引出，连接出口，根据每个小时运行量来收集体积

树脂技术 发表于 2019-07-09 11:16
1.湿法装柱要求不能让树脂柱产生气泡，要求装置时出水口流速要

请问，如何确定洗脱液何时开始收集？因为液体都是连续加入的，加入洗脱液时下部还有部分液体。需要等到下部液体全部排出，洗脱液正好到下部出口位置开始收集才代表开始收集所需液体。这个尺度如何把握？

首先根据树脂体积来算洗脱液，比如1BV（树脂体积倍数）一倍是50ml，那我们取解析液也是50ml，100ml，150ml 三个样品（总和是150ml）取三个样分别测定，然后料液过完的必须要用吸耳球压干，然后进行过解析液

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