分子筛色谱求助

HPLC，用sepax的分子排阻色谱做一些多肽，蛋白质检测时，连续做几天就会出现柱效下降的情况。但是放置一段时间（数天）后，再做实验是柱效又自己恢复了，找不到原因

分子筛色谱柱效下降的原因可能有很多，常见的包括样品残留、柱寿命等。建议你从以下几个方面排查：

1. 样品处理：检查样品的质量和处理方法是否正确，确保样品中没有杂质和残留物。

2. 柱寿命：如果柱已经使用了较长时间，可能需要更换柱子，推荐使用一些好的品牌柱子，例如Waters、Agilent等。

3. 流动相：检查流动相的组成是否正确，是否存在氧化剂、盐酸等，同时要注意流速和梯度条件的设置。

4. 清洗：尝试对柱进行反向洗涤和前向洗涤，清除可能存在的杂质。

5. 每次实验后需要及时的进行柱的维护，保养柱子。

同时建议你在柱效下降前进行柱子截留，用洗脱剂洗柱子，以排除可能的杂质影响。如果以上方法不起作用，可以考虑联系厂家进行技术支持。
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柱子该老化了

威风的奥特曼。 发表于 2023-5-31 16:53
柱子该老化了

液相色谱柱有对分离柱进行老化操作一说么？

因为是排阻色谱，柱填料一般是具有一定孔隙度的填料，这种填料有一个特性就是对于小于填料孔隙的组分优先洗脱出柱系统。
在分析肽和蛋白质后，柱效下降，说明有一些大分子组分占据了填料的较大孔隙，从而对肽和蛋白质这些大分子的保留-分离效能下降，而在停用柱子一段时间后，由于这些肽和蛋白质在淋洗液的环境下，会降解或分解成较小的分子，这样原来被 这些大分子占据有那些孔隙被释放出来，所以色谱柱的柱效就有一定程度甚至是完全恢复的现象。
排阻色谱如果是连续运行，最好能多配置一根或两根分离柱。
在一些合成高分子分析的排阻色谱中，也有类似现象。

一点个人浅见而已