不同电子受体浓度对反硝化除磷有何影响

随着微生物学在污水处理领域的深化，反硝化聚磷菌(DPAOs)的发现颠覆了人们对传统生物脱氮除磷的认识。反硝化除磷的实现使得COD消耗量节省50%，吸磷过程由缺氧代替好氧，节省30%曝气量，相应的污泥产量减少50%，同时释放的CO2降低20%左右。基于反硝化除磷的理念，新型双污泥工艺——A2/O-移动床生物膜反应器(MBBR)应运而生。它具有处理流程简单，运行管理方便，脱氮除磷效果稳定等诸多优点，可实现低碳氮比(C/N)废水的深度脱氮除磷和节能降耗，应用前景较好。反硝化除磷工艺的改进和优化，使得传统污水处理工艺朝着高效率、低能耗的可持续方向发展。

　　反硝化除隣过程DPAOs对磷的吸收依赖于电子受体(NO3--N或NO2--N)，MERZOUKI等研究表明，反硝化除磷效率很大程度上取决于电子受体的类型和浓度，然而由于反硝化除磷体系和运行条件的不同，缺氧段对电子受体的需求不尽相同。刘建广等采用厌氧/缺氧/好氧交替运行模式富集培养DPAOs，发现NO3--N浓度大于30 mg·L-1时，吸磷速率几乎不受NO3--N浓度的影响。杨文婷等采用一次性投加硝酸盐，当浓度小于25 mg·L-1时，硝酸盐与磷的去除呈线性关系，每去除1 mg·L-1的NO3--N同时吸收1.21 mg·L-1的PO43--P，而ZHOU等得出去除1 mg·L-1的NO3--N可吸收1.12 mg·L-1的PO43--P的结论。作为一种新型的反硝化除磷工艺，电子受体对A2/O-MBBR系统中污泥脱氮除磷特性的影响尚不明确。

　　连续流系统是一个动态变化过程，水质波动较大，多种生化反应交互影响，许多实验现象和微观特性不能直观体现。考虑到连续流系统影响因素的复杂性以及不可控性，本研究以A2/O-MBBR系统长期处理低C/N生活污水的反硝化除磷污泥为研究对象，采用批次实验，考察单因素——不同电子受体浓度对反硝化除磷和动力学特性的影响，从而为A2/O-MBBR系统的工程实践和推广应用提供理论依据。

　　1 实验部分

　　1.1 实验装置

　　如图1所示，A2/O-MBBR系统由A2/O反应器、中间沉淀池、MBBR、沉淀区顺序连接组成。原水经进水泵进入A2/O反应器，在厌氧区、缺氧区、好氧区的推流作用下完成同步脱氮除磷，出水进入中间沉淀池实现泥水分离。上清液进入MBBR系统，沉淀污泥回流到A2/O反应器的厌氧区(污泥回流比100%)。含有氨氮的上清液在MBBR沿程推流完成氨氮的氧化，硝化液经沉淀区回流到A2/O反应器的缺氧区(硝化液回流比300%)，为反硝化除磷过程提供电子受体。

　　A2/O反应器有效容积28 L，均分为8个格室，水力停留时间8 h，厌氧、缺氧、好氧区容积比为1：6：1;厌氧区和缺氧区内设有搅拌装置，好氧区进行短暂曝气，污泥龄(SRT)控制在10 d左右。中间沉淀池为竖流式，采用中间进水周边出水的运行方式，有效容积10 L，剩余污泥定期排放。MBBR 3格串联，有效容积10.5 L，内设聚丙烯悬浮填料(尺寸D × H为5 mm × 3 mm，填充率50%)，溶解氧3.0~4.0 mg·L-1，总曝气量 0.15 m3·h-1左右，主要完成氨氮的氧化，最后出水直接排放。

　　图1 A2/O-MBBR装置流程图

　　1.2 污泥特性

　　A2/O-MBBR系统的接种污泥取自扬州市汤汪污水处理厂CASS反应池的生化污泥，实验用水取自扬州大学生活区的化粪池，进水C/N为2.25~3.40，属于典型的低C/N污水。系统连续运行200 d左右，脱氮除磷性能基本稳定(氮磷去除率分别为80%和96%)，进出水的水质特性见表1。采用WACHTMEISTER等推荐的方法得出DPAOs占聚磷菌(PAOs)的比例约为65%，菌群生物活性较好，本研究在此条件下开展了批次实验。

　　表1 A2/O-MBBR系统进出水水质特性

　　1.3 批次实验安排

　　实验污泥取自连续流系统长期稳定运行条件下的活性污泥，用蒸馏水清洗3遍，防止残留基质对反应过程造成不利影响。批次实验分为2个阶段：阶段I，采用人工配水，将清洗后的污泥定容至有效容积5 L的密闭反应瓶中，混合液挥发性悬浮固体浓度(VSS)为3 000 mg·L-1左右，投加乙酸钠后开始厌氧搅拌，在消耗外碳源储存聚-β-羟基链烷酸脂(PHAs)的同时完成释磷过程;阶段Ⅱ，厌氧反应结束后将混合液等分为5份，分别置于有效容积1 L的反应瓶中，投加NO3--N作为电子受体，以阶段І中的PHAs为电子供体，同步脱氮除磷。

　　在阶段Ⅱ中，通过改变初始电子受体浓度(NO3--N：10，20，30，40，50 mg·L-1)，探究不同条件下内碳源转化利用情况及其对缺氧反硝化除磷的影响，并通过动力学特性的对比分析阐释脱氮除磷机理。实验在室温(20 ℃)下进行，反应过程中为防止形成聚磷酸盐沉淀，通过投加1 mol·L-1的HCl或NaOH溶液调节pH在7.5左右。

　　1.4 常规项目监测方法

　　COD采用快速消解仪(SUNTEXTR-1100)测定;  PO43--P，NO3--N，NO2--N等指标以及污泥浓度MLSS、VSS根据标准方法测定;  PHAs采用气相色谱(Agilent 6 890N)及DB-1型色谱柱检测;糖原(GLY)采用蒽同法测定。

　　1.5 动力学参数计算

　　在厌氧阶段，DPAOs通过吸收外碳源以PHAs的形式储存在细胞体内，GLY的分解和多聚磷酸盐的水解为此过程提供能量，动力学参数计算如下：

　　释磷量:   QPRA = PAn-t2 - PAn-t1(1)

　　比释磷速率:   RPRR = (PAn-t2 - PAn-t1)/(CVSS-An·ΔTAn) (2)

　　比耗碳速率:   RCUR = (CAn-t1 - CAn-t2)/( CVSS-An·ΔTAn) (3)

　　在缺氧阶段，DPAOs分解PHAs，以NO3--N为电子受体同步脱氮除磷，动力学参数计算如下：

　　反硝化脱氮量:   QDNA = NA-t1 - NA-t2(4)

　　吸磷量:   QPUA = PA-t1 - PA-t2(5)

　　比反硝化速率:   RDNR = (NA-t1 - NA-t2)/( CVSS-A·ΔTA) (6)

　　比吸磷速率:   RPUR = (PA-t1 - PA-t2)/( CVSS-A·ΔTA) (7)

　　式中：CAn-t1、CAn-t2为厌氧阶段t1、t2时刻的COD浓度，mg·L-1;  PAn-t1、PAn-t2为厌氧阶段t1、t2时刻的PO43--P浓度，mg·L-1;  PA-t1、PA-t2、NA-t1、NA-t2为缺氧阶段t1、t2时刻的PO43--P和NO3--N浓度，mg·L-1;CVSS-An、CVSS-A为厌氧和缺氧阶段的平均污泥浓度，mg·L-1;ΔTAn或ΔTA为t1、t2反应时间间隔，h。

　　2 结果与讨论

　　2.1 实验条件的选择和确定

　　2.1.1 碳源投加量及厌氧反应时间

　　如图2所示，当乙酸钠(以COD计)浓度在50~250 mg·L-1变化时，释磷量随着反应时间的进行不断增加，但在90~20 min之间出现释磷平台，最高PO43--P浓度分别为16.35、27.88、35.29、40.88和39.24 mg·L-1，随后PO43--P含量均呈现下降趋势。由于DPAOs吸收外碳源合成PHAs的能力存在极限值，一旦PHAs合成量达到最大值，便不再利用外碳源，导致高COD浓度时出现无效释磷;而厌氧反应时间过长容易导致微生物暴露于饥饿状态，出现吸磷现象。本实验条件下，最佳乙酸钠投加量和厌氧反应时间分别为200 mg·L−1、90 min。

　　图2 不同COD浓度下释磷情况

　　2.1.2 缺氧反应时间

　　由于反硝化除磷主要在缺氧段完成，维持适当的缺氧反应时间对保证良好的脱氮除磷效果至关重要。表2对比了缺氧反应时间60~300 min的反硝化除磷特性(初始NO3--N、PO43--P浓度分别为(35 ± 2) mg·L-1、(40 ± 3) mg·L-1)，当缺氧反应时间120 min时，同步脱氮除磷性能最佳(均超过99%)，PUR为7.45 mg·(g·h)-1，DNR为5.82 mg·(g·h)-1，平均每吸收1 mg PO43--P可去除0.78 mg NO3--N。缺氧反应时间过短，反硝化吸磷不充分;缺氧反应时间过长，微生物因电子供体、电子受体消耗殆尽而处于饥饿状态，生物活性下降，甚至发生2次释磷现象。

　　表2 不同缺氧反应时间下的反硝化除磷特性

　　综上，确定本研究的实验条件：阶段I，投加200 mg·L-1乙酸钠，厌氧反应时间90 min;阶段Ⅱ，投加电子受体NO3--N，缺氧反应时间120 min。在此基础上，考察不同NO3--N浓度(10~50 mg·L-1)条件下的反硝化除磷特性。

　　2.2 厌氧释磷及碳源的转化利用

　　如图3所示，厌氧初始时刻COD浓度为196.72 mg·L-1，随着反应的进行，COD浓度快速降低，到75~90 min时，COD浓度从32.10 mg·L-1降为30.61 mg·L-1，可利用外碳源基本消耗殆尽。与此同时，PHAs与GLY含量此消彼长，PHAs含量从53.11 mg·g-1增加至133.40 mg·g-1，90 min时几乎全部外碳源都以PHAs的形式储存于细胞体内，同时伴随着少量GLY分解(浓度从156.21 mg·g-1降为117.36 mg·g-1)。整个过程COD利用率为84.57%，比耗碳速率为36.91 mg·(g·h)-1。

　　图3 厌氧阶段碳源转化与释磷情况

　　此外，碳源转化利用过程中，释磷速率出现明显的分界(阶段a和阶段b)，PO43--P浓度从初始时刻的0.07 mg·L-1快速上升，45 min时增大到34.13 mg·L-1;在随后的45~90 min内，PO43--P浓度增加缓慢，增幅仅为6.75 mg·L-1。2个阶段PRR分别为15.14 mg·(g·h)-1和3.0 mg·(g·h)-1，与图3中内碳源PHAs(ΔPHAs=57.26、23.04 mg·g-1)和GLY(ΔGLY=24.61、14.24 mg·g-1)的变化利用规律相吻合。阶段a中PHAs合成量是阶段b的2.49倍，表明厌氧45 min后虽然COD浓度一直在降，但是内碳源的转化效率已经不高。内碳源转化和释磷情况均表明，厌氧90 min已实现最优的处理效果。WANG等在A2N-SBR中同样发现厌氧反应时间90 min时，系统合成的PHAs含量最高，氮磷去除率分别达到91%，94%;并且当厌氧反应时间延长，PHAs含量的降低导致缺氧段PHAs分解效率下降，出现游离亚硝酸积累，脱氮除磷效果变差。

　　2.3 缺氧反硝化除磷特性

　　2.3.1 不同NO3--N浓度下的脱氮除磷特性

　　在图4中，当NO3--N浓度为10 mg·L-1和20 mg·L-1时，NO3--N在45~60 min内反应完全，且整个过程NO2--N积累很微弱(0.05~0.2 mg·L-1)，基本可以忽略不计;但由于电子受体不足导致吸磷受限，到60 min时，PO43--P浓度分别残留23.98 mg·L-1和15.14 mg·L-1，后续反应过程都出现不同程度的2次释磷现象(如图4(c)箭头所示)。

　　NO3--N浓度增加到30 mg·L-1，反应时间120 min时NO3--N和PO43--P浓度为1.09 mg·L、0.25 mg·L-1，去除率分别为96.37%和99.39%，实现了同步高效脱氮除磷。当NO3--N增加到40 mg·L-1，电子受体有部分剩余，反应结束时NO3--N仍残留3.09 mg·L-1，但PO43--P在反应时间105 min时已完全去除，氮磷去除率分别为92.28%和100%。此外，上述2种工况在前60 min均出现不同程度的NO2--N积累，最高可达到3.12 mg·L-1和4.26 mg·L-1，但在后续反应NO2--N被逐步反硝化，且除磷效果基本不受影响。

　　而当NO3--N浓度增加到50 mg·L-1时，整个反应过程伴随着明显的NO2--N积累，到90 min时，NO2--N浓度高达6.5 mg·L-1且后续略有上升趋势(如图4(b)箭头所示)。ZHOU等和JABARI等均发现，NO2--N的存在会抑制DPAOs的生物活性且限制同步脱氮除磷效率，到反应结束时NO3--N和PO43--P浓度分别为23.38 mg·L-1和9.05 mg·L-1，去除率仅为53.24%和77.86%。

　　图4 NO3--N浓度对脱氮除磷效果的影响

　　单从脱氮除磷效率看，在本研究条件下(取自A2/O-MBBR系统的反硝化除磷污泥，DPAOs占PAOs比例约为65%)，以NO3--N为电子受体进行反硝化除磷时，当NO3--N投加量为30 mg·L-1时较为合适，与傅金祥等的研究结论相同，即硝酸盐型反硝化除磷过程最佳电子受体投加量为30 mg·L-1时，DPAOs能最大程度地利用NO3--N进行同步脱氮除磷。

　　2.3.2 不同NO3--N浓度下的内碳源转化利用特性

　　为了进一步考察不同NO3--N浓度条件下的反硝化除磷特性，图5对比了内碳源PHAs和GLY的转化利用情况(其中缺氧初始时刻PHAs、GLY的含量分别为132.4~134.5 mg·g-1和116.2~118.36 mg·g-1 )。当NO3--N浓度为10 mg·L-1和20 mg·L-1时，前阶段NO3--N的快速反应伴随着PHAs的消耗和GLY的合成，反应60 min时GLY含量分别为134.80 mg·g-1和138.41 mg·g-1，PHAs含量分别为89.15 mg·g-1和65.30 mg·g-1，且PHAs在后续反应中基本保持不变;但60 min后，虽然NO3--N消耗完全，GLY却存在降解的趋势，2种工况ΔGLY分别为25.06 mg·g-1和17.8 mg·g-1 (见图5)。BASSIN等认为当电子供体或电子受体消耗殆尽时，微生物会由于处于饥饿状态而出现GLY降解的现象，长期运行对DPAOs的生长富集是不利的。

　　图5 NO3--N浓度对PHAs和GLY转化利用特性的影响

　　当NO3--N浓度为30 mg·L-1和40 mg·L-1时，整个反应过程PHAs和GLY此消彼长，PHAs的减少量分别为114.92 mg·g-1和110.77 mg·g-1，GLY的增加量分别为55.98 mg·g-1和69.16 mg·g-1。由于微生物体内需保持一定量的PHAs来维持自身的生命活动，反应结束120 min时，PHAs的含量为18.48~20.73 mg·g-1，PHAs利用率为84.6%~86.2%。研究表明改良UCT分段进水工艺中出水PHAs含量为0.8~1.1 mmol·L-1(相当于13~19 mg·g-1)时，系统展现出较好的反硝化除磷性能。

　　当NO3--N浓度增加到50 mg·L-1时，NO3--N负荷的增加以及NO2--N积累(见图4(b))导致DPAOs生物活性下降，同样限制了内碳源转化利用效率，反应结束时出水中PHAs仍残留42.10 mg·g-1，PHAs利用率仅为68.4%，造成内碳源的浪费，该结果与2.3.1中脱氮除磷效率的下降相吻合。综合脱氮除磷效果以及内碳源转化效率，在本研究的特定条件下，当NO3--N浓度为30~40 mg·L-1时较为适宜。

　　2.4 反硝化除磷的动力学分析

　　结合式(1)~式(7)，表3对比了厌氧阶段以及缺氧阶段不同NO3--N浓度下的反硝化除磷动力学参数。厌氧释磷过程较高的CUR促进了磷酸盐的快速分解，PRR最高达15.14 mg·(g·h)-1，不同NO3--N浓度下缺氧吸磷过程PUR为4.32~8.18 mg·(g·h)-1，电子受体不足(NO3--N浓度为10~20 mg·L-1)或电子受体过剩(NO3--N浓度为50 mg·L-1)均不利于吸磷反应的进行。PENG等[3]考察了A2/O分段进水和UCT工艺的反硝化除磷特性，2种工艺中PRR和PUR分别为4.44 mg·(g·h)-1、1.33 mg·(g·h)-1和7.91 mg·(g·h)-1、3.19 mg·(g·h)-1。对比结果表明，A2/O-MBBR系统的污泥体现了优越的反硝化除磷性能，意味着双污泥系统中DPAOs具有较高的生物活性。

　　

表3 不同运行工况下的反硝化除磷动力学参数

　　　　缺氧阶段NO3--N浓度与反硝化除磷特性密切相关，DNR一定程度上反映了DPAOs的反硝化潜力。当NO3--N浓度为30 mg·L-1和40 mg·L-1时，DNR达到了最高值5.72~6.08 mg·(g·h)-1，而NO3--N浓度为10 mg·L-1时，DNR仅为1.81 mg·(g·h)-1，但该结果依然高于某PAOs富集的生物膜系统(DNR=1.45 mg·(g·h)-1)。除此之外，NO3--N/PO43--P比值与NO3--N负荷也呈现相关性，间接反映了DPAOs的反硝化除磷潜力。反硝化除磷过程平均吸收1 mg PO43--P 可去除0.42~0.75 mg NO3--N，高于完全混合式SNDPR系统(0.33 mg NO3--N)以及悬浮污泥和生物膜共存的IFAS系统(0.41~0.72 mg NO3--N)。双污泥系统中DPAOs和硝化菌的分离、富集，是提高反硝化除磷性能的主要原因，上述分析进一步验证了A2/O-MBBR系统在处理低C/N比污水方面的优越性。

　　3 结论

　　1)乙酸钠投加量200 mg·L-1，厌氧反应时间90 min时释磷完全，PO43--P浓度最高可达40.88 mg·L-1，PHAs合成量为133.40 mg·g-1，比耗碳速率为36.91 mg·(g·h)-1;缺氧反应时间120 min时，可获得最佳的同步脱氮除磷效果。

　　2)厌氧释磷速率在45 min时出现明显的分界，2个阶段的释磷速率分别为15.14 mg·(g·h)-1和3.0 mg·(g·h)-1，前者PHAs合成量是后者的2.49倍。

　　3)在本研究条件下，缺氧段NO3--N浓度为30 mg·L-1时，可实现同步高效脱氮除磷，氮磷去除率分别为96.37%和99.39%。NO3--N浓度增加到40 mg·L-1时，PHAs利用率从84.6%上升为86.2%且除磷效果不受影响，得出NO3--N的最佳投加量为30~40 mg·L-1。

　　4)反硝化除磷过程最高PUR为8.16~8.18 mg·(g·h)-1，DNR高达5.72~6.08 mg·(g·h)-1，吸收1 mg PO43--P 可去除0.42~0.75 mg NO3--N，处理性能优于传统反硝化除磷工艺，揭示了A2/O-MBBR系统中DPAOs较高的生物活性。(来源：环境工程学报 作者：张淼)

反硝化厌氧除磷原理简单，但是一直是各污水处理厂控制的难点